摘要:由于冬虫夏草与亚香棒虫草极为相似,所以冬虫夏草的理化鉴别常被用于冬虫夏草与亚香棒虫草的区分。
由于冬虫夏草与亚香棒虫草极为相似,所以冬虫夏草的理化鉴别常被用于冬虫夏草与亚香棒虫草的区分。具体方法如下:
①将适量的冬虫夏草和亚香棒虫草样品分别研磨成粉,各取样品粉末1克,用乙醚溶出杂质后,用氯仿提取,滤过,滤液挥去氯仿,滴加冰醋酸2滴,再加乙酸酐2滴,最后加浓硫酸1~2滴。正宗冬虫夏草显棕黄色—红紫色—污绿色;亚香棒虫草显棕黄色—紫色—墨绿色。
②将上述经氯仿提取过的粉末,再用20%乙醇回流提取,并浓缩至适量后。第一,取浓缩液0.5毫升,用蒸馏水稀释至2~3毫升,先加40%氢氧化钠溶液2毫升,振摇,然后加1%硫酸铜试剂数滴(不可加过量,以免掩盖颜色),振摇,溶液逐渐变为紫红色。冬虫夏草呈弱颜色反应;亚香棒虫草呈较强的颜色反应。第二,取浓缩液0.5毫升,稀释至1毫升,加稀盐酸数滴,再加碘化铋钾试液数滴,放置10分钟后,产生黄色絮状沉淀。在另一支试管中,同上操作后,滴加碘一碘化钾试液,产生混浊。
③分别取冬虫夏草和亚香棒虫草加酸性乙醇1:7提取,再分别取溶液1毫升,放置365纳米的荧光灯下观察,冬虫夏草提取液呈淡蓝色荧光,而亚香棒虫草提取液呈黄绿色荧光。
经过多年野外标本采集和室内研究工作,中科院微生物研究所科研人员对冬虫夏草进行DNA测序后得到100多条相关的“分子序列”,并建立起了冬虫夏草DNA数据库和分子鉴定体系,保证了冬虫夏草的准确鉴定。
经过和国际基因银行进行比对,科研人员完成的60多条ITS序列,属于世界上第一次大批量测定的新的冬虫夏草分子序列。